近年来,FDA积极推进减少动物实验,不仅出台规定限制动物实验的使用范围,还加大了对非动物实验技术的支持和推广力度。在这一背景下,活细胞实验模式也在不断演变,研究者们逐渐从单层细胞培养转向3D模型,如类器官模型。这种转变主要是因为3D模型能够更好地模拟体内环境,从而增强研究的生理相关性。3D模型的构建可以采用人工方式,也可以依赖于天然存在的模型,例如组织或小型模式生物体,如斑马鱼和线虫等。
在将活细胞检测转向类器官等3D模型的过程中,研究者们会面临几个关键挑战。在近期的安捷伦细胞分析TekTalk中,应用专家们探讨了应对这些挑战的创新解决方案。
1. Metabolic Research with Seahorse XF Technology
使用安捷伦SeahorseXF技术进行代谢研究的关键在于适应更大的样品尺寸,同时确保灵敏度不受影响。SeahorseXFFlex分析仪和其专用耗材能够通过特殊的捕获环将组织样品和小型生物体固定在微孔板中,结合先进的检测与自动混合条件,实现类器官和组织材料等3D研究模型的实时代谢分析。阅读我们的应用说明,您将了解如何通过精确的组织切片和打孔来控制组织厚度、数量和解剖位置。
2. Challenges in High-Resolution Imaging
与单层细胞相比,3D组织和完整生物体的高分辨率成像面临更多技术挑战。在对3D生物样本进行成像时,安捷伦BioTekCytationC10共聚焦成像系统与BioTekGen5软件相结合,有效克服了传统宽场显微镜在光学切片能力和背景噪声控制方面的限制,从而显著提升了成像分辨率。阅读我们的应用说明,您可以了解到这些技术是如何帮助研究人员更准确地分析和表征复杂的三维结构。
特色应用说明和技术概述
对于脑组织及其他三维模型的实时代谢分析,我们介绍了一种先进的分析系统。神经元的发育与功能属于人体中能量需求最高的生物过程之一。本应用说明详细探讨了使用SeahorseXFFlex分析仪、SeahorseXFFlex3DCapture微孔板-L和SeahorseXF3D线粒体压力测试试剂盒对不同脑区样本切片进行能量代谢检测和定量评估的简化工作流程。优化的分析流程,可以有效地对活组织样品进行代谢测量。
3. Visualization of Mouse Retinal Vasculature
使用安捷伦BioTekCytationC10共聚焦成像微孔板检测系统对小鼠视网膜血管结构进行可视化分析,是研究血管生成及其相关病理机制的重要工具。本应用简报展示了使用安捷伦BioTekCytationC10与BioTekGen5软件高效获取小鼠视网膜血管高分辨率图像的方法。
4. Zebrafish Eye Structure Imaging
本研究验证了整体免疫荧光成像结合共聚焦显微技术在斑马鱼眼部精细结构展示方面的有效性。研究人员使用安捷伦BioTekCytationC10,获得了高分辨率、低背景信号的深入组织层图像,清晰呈现了晶状体纤维与视网膜分层的微观解剖特征。
提高实验成功率的小技巧
安捷伦SeahorseXFFlex分析仪可以支持在24孔板中同步测量氧气消耗率(OCR)、质子外排率(PER)或细胞外酸化率(ECAR)以及ATP生成率。该系统配备标准化流程与专用耗材,以支持对类器官和组织样本等3D模型进行实时代谢分析。对线粒体呼吸与糖酵解活动的分析可获得更具生理相关性的结果,提升研究的转化潜力与应用价值人生就是博-尊龙凯时。
安捷伦BioTekCytationC10成像系统则可深入解析复杂生物系统的结构与功能。该系统结合多种成像模式,专为实现组织水平及完整生物体的高分辨率成像而设计,其转盘共聚焦技术与水浸物镜的结合能够显著提升图像质量,对于3D细胞培养模型小鼠视网膜及整条斑马鱼胚胎的研究具有重要意义。
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